果蔬组织pod酶活(综合果蔬活性酶)
植物组织pod活性的测定注意事项
1、待测样品中不能含有酶抑制剂,同时需避免反复冻融。 POD酶液提取时,注意低温操作,防止酶活性。 以煮沸的酶液为对照时,酶要充分失活。 Pod氧化剂具有一定腐蚀性,请小心操作。 POD氧化剂易挥发,请密闭保存,否则检测效率下降。 如果没有分光光度计,也可以使用普通的酶标仪测定,每次检测指标不宜过多,否则操作时间不一,有可能导致样本间的差异。
2、植物体内过氧化物酶(POD)活性的测定通常采用光度法或荧光法。光度法:将植物组织或提取物加入含有过氧化氢和双甲基苯酚的反应液中,过氧化物酶催化过氧化氢分解产生的游离基与双甲基苯酚发生氧化反应,生成苯醌衍生物,产生黄色或棕色的化合物。可以通过测定反应液的吸光度或比色板的读数来测定POD活性。
3、植物POD活性的正常范围是440.327~52463U/g。这个范围是通过对大量植物样品的测量得出的平均值和标准差。POD活性的单位是U/g,表示每克植物组织中的过氧化物酶活性。POD活性的测量通过酶学方法进行,常用的是测定POD催化反应产生的染色产物的吸光度变化。这种测量方法可以反映出植物体内POD的活性水平。
果蔬中过氧化物酶活性的测定
1、实验所需材料包括各种果蔬,以及研磨设备、离心机、分光光度计等仪器,以及醋酸缓冲液、愈创木酚、H2O2等试剂。具体制备过程中,需先制备酶液,通过研磨果蔬并离心提取酶提取液,然后进行活性测定,通过在特定波长下测定吸光度变化,计算出每分钟吸光度变化值,以此确定过氧化物酶的活性。
2、果蔬中过氧化物酶活性的测定主要通过愈创木酚法进行。具体方法和注意事项如下:测定方法: 原理:过氧化物酶催化H2O2氧化酚类物质,产生有色化合物。在愈创木酚法中,POD催化H2O2将愈创木酚氧化为红棕色的4邻甲氧基苯酚,该物质在470 nm处有高光吸收,因此可利用比色法测量其活性。
3、检验酶的活性。烫漂时间一般以过氧化氢酶和过氧化物酶恰好失活为标准来确定烫漂的时间。
4、过氧化物酶属于最耐热的酶类,在果蔬加工中常被当作热处理是否充分的指标。
5、保持果蔬原有的色、香、味。测定过氧化氢酶活力对果蔬加工可以保持食品原有色、香、味,过氧化氢酶还可防止果蔬冷冻保藏时的发酵变质以达到保鲜效果。过氧化氢酶是催化过氧化氢分解成氧和水的酶,存在于细胞的过氧化物酶体内。
pod活性是什么意思
初期:POD活性通常会迅速上升,以清除因干旱导致的过量活性氧(ROS)。持续期:随着干旱时间延长,POD活性可能先达到峰值后下降,表明植物抗氧化系统逐渐受到抑制。盐碱胁迫:初期:POD活性会在短时间内增加,应对盐分积累引起的氧化应激。
活性酶。POD活性是一种活性酶,是过氧化物酶广泛存在于植物体中,是活性较高的一种酶。它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有关系,在植物生长发育过程中它的活性不断发生变化。
“是植物体内普遍存在且活性高的一种酶”。过氧化物酶催化以H2O2为氧化剂的氧化还原反应,在氧化别的物质的同时,将H2O2还原为H20,用以清除细胞内的H2O2,是植物体内的保护酶之一。
pod酶活性测定方法
1、pod酶活性测定方法有定时法、连续监测法、平衡法。定时法 通过测定酶反应开始后某一时间段内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或物的变化。优点:简单易行,对试剂要求不高。缺点:难保证测定结果的真实性。
2、植物体内过氧化物酶(POD)活性的测定通常采用光度法或荧光法。光度法:将植物组织或提取物加入含有过氧化氢和双甲基苯酚的反应液中,过氧化物酶催化过氧化氢分解产生的游离基与双甲基苯酚发生氧化反应,生成苯醌衍生物,产生黄色或棕色的化合物。可以通过测定反应液的吸光度或比色板的读数来测定POD活性。
3、POD测定:酶液稀释10倍,取50uL待测液与2mL POD反应液和1mL 0.2mo1/L的磷酸二氢钾溶液反应,用紫外分光光度计于470nm处每隔30sec测其吸光值A470,重复3次求平均值,以△A470/min/gFW表示酶活大小。SOD(超氧化物歧化酶活性)的测定 试剂:① 0.05mol/l磷酸缓冲液(PH值为8)。